Тип публикации: статья из журнала
Год издания: 2026
Идентификатор DOI: 10.7868/S3034505726030159
Ключевые слова: bacterial luciferase, bioluminescence, protein luminescence, Stopped-flow technique, enzymatic catalysis, бактериальная люцифераза, биолюминесценция, люминесценция белка, метод остановленного потока, ферментативный катализ
Аннотация: В работе предложен экспериментальный метод регистрации скоростей отдельных стадий реакции, катализируемой бактериальной люциферазой, основанный на триптофановой флуоресценции фермента и методе остановленного потока. Обоснована связь интенсивности флуоресценции триптофановых остатков люциферазы с присутствием субстратов и продуктов Показать полностьюреакции в активном центре фермента. Проанализирована нестационарная кинетика биолюминесценции в реакции двух видов бактериальных люцифераз с алифатическими альдегидами с разной длиной цепи, а также кинетика интенсивности флуоресценции ферментов в ходе реакции. Получены результаты, подтверждающие связь скорости двух кинетических стадий люминесценции фермента с процессами связывания флавинового субстрата и восстановления активности фермента после каталитического акта. The study proposes an experimental approach to determining the rates of individual stages of a reaction catalyzed by bacterial luciferase, based on the tryptophan fluorescence of the protein and the stopped-flow technique. The relationship between the fluorescence intensity of luciferase's tryptophan residues and the presence of substrates and reaction products in the enzyme's active site is substantiated. The non-steady-state kinetics of bioluminescence in the reaction of two bacterial luciferases with aliphatic aldehydes of different chain lengths, as well as the kinetics of enzyme fluorescence intensity during the reaction, were analyzed. The obtained results confirmed the relationship between the rate of the two kinetic stages of enzyme luminescence and the processes of flavin substrate binding and enzyme activity recovery after the catalytic act.
Журнал: Доклады Российской академии наук. Науки о жизни
Выпуск журнала: Т.528, №1
Номера страниц: 313-320
ISSN журнала: 26867389
Место издания: Москва
Издатель: Российская академия наук