Тип публикации: статья из журнала

Год издания: 2025

Ключевые слова: cryopreservation, ehrlich ascites carcinoma, EPR spectroscopy, Metal-containing proteins, cell viability, криоконсервация, асцитная карцинома Эрлиха, ЭПР-спектроскопия, металлсодержащие белки, жизнеспособность клеток

Аннотация: Надежным методом длительного хранения клеточных линий является криоконсервация, однако процесс замораживания, хранения и оттаивания может вызывать повреждение клеток, включая окислительный стресс и деградацию макромолекул. В данной работе методом электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) рассмотрено влияние различных температур криохранения (-20°C, -80°C, -196°C) на металлсодержащие ферменты в клетках асцитной карциномы Эрлиха (АКЭ). Установлено, что хранение суспензии клеток, разведенных в культуральной среде с криопротекторами, при температуре -20°C приводит к значительному окислению Fe²⁺ в Fe³⁺, снижению интенсивности ЭПР сигнала от молибденсодержащих молекул (Mo⁵⁺) и полному исчезновению сигнала от церулоплазмина (Cu²⁺), что приводит гибели клеток в данном образце АКЭ. При температуре -80°C и -196°C наблюдалось частичное сохранение интенсивности ЭПР сигналов от парамагнитных центров Fe²⁺ и Mo⁵⁺, однако сигнал от церулоплазмина также отсутствовал. Наибольшая жизнеспособность клеток отмечена при -80°C, тогда как сверхбыстрое замораживание в жидком азоте (-196°C) увеличивало долю погибших клеток в суспензии после размораживания. Несмотря на биохимические изменения, клетки после криоконсервации при -80°C и -196°C сохраняли онкогенный потенциал in vivo , формируя асцитную опухоль в брюшной полости мышей. Полученные данные указывают на то, что для оптимизации протоколов криохранения и повышения жизнеспособности клеток АКЭ в качестве добавок к криосреде можно использовать компоненты, обладающие антиоксидантными свойствами. The method for the long-term preservation of cell lines is cryopreservation. In this study, the effect of cryostorage temperatures (-20°C, -80°C, -196°C) on a suspension of Ehrlich ascites carcinoma (EAC) cells was determined using electron paramagnetic resonance (EPR) It was shown that cryostorage of a cell suspension at -20°C leads to significant oxidation of Fe²⁺ to Fe³⁺, a decrease of the intensity the EPR signal from molybdenum-containing molecules (Mo⁵⁺) and a complete disappearance of the signal from ceruloplasmin (Cu²⁺), which is the cause of cell death in this EAC sample. At -80°C and -196°C, partial preservation of EPR signal intensities from paramagnetic centers (Fe²⁺and Mo⁵⁺) was observed, but the ceruloplasmin signal was still absent. The highest cell viability was observed at -80°C, whereas ultra-rapid freezing in liquid nitrogen (-196°C) increased the proportion of dead cells in the suspension after thawing. Despite the biochemical changes, cells cryopreserved at -80°C and -196°Cretained their oncogenic potential in vivo, forming ascitic tumors in the abdominal cavity of mice. The obtained data suggest that to optimize cryopreservation protocols and improve EAC cell viability, antioxidant components can be used as supplements to the cryomedium.

Журнал: Актуальные вопросы биологической физики и химии

Выпуск журнала: Т. 10, № 3

Номера страниц: 197-201

ISSN журнала: 24999962

Место издания: Севастополь

Издатель: Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Севастопольский государственный университет

• Шабанова Д. А. (Сибирский федеральный университет)
• Крюкова О. В. (ФИЦ Красноярский научный центр СО РАН)
• Тюменцева А. В. (ФИЦ Красноярский научный центр СО РАН)
• Максимов Н. Г. (ФИЦ Красноярский научный центр СО РАН)
• Столяр С. В. (Сибирский федеральный университет)

• РИНЦ (eLIBRARY.RU)